科研小白的第一步——看懂流式细胞图
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发布时间:2024-10-22 18:29
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时间:2024-10-23 04:16
医学研究中,实验数据的处理与分析极为关键,而图像作为常见展现形式,对于理解文献至关重要。初入研究领域的学者常在面对文献中繁多、色彩斑斓的图像时感到困惑。一篇医学文献通常包含20至70张图片,若不熟悉其内容,难以深入理解研究内容。
在多种实验数据图中,流式细胞图最令研究新手感到困惑。本文旨在介绍流式细胞术的基本原理及其图像解读方法。
流式细胞术的核心是流式细胞仪,它是一种自动分析和分选细胞的装置。该设备能快速测量、存储、显示悬浮在液体中的分散细胞的生物物理、生物化学特征参数,并能根据预设参数范围筛选出特定细胞亚群。
流式细胞仪工作原理为:细胞在鞘液的流体力学作用下聚拢,通过激光束检测。检测器分别检测前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC),以及染色细胞发射的荧光。FSC与细胞大小相关,SSC反映细胞颗粒度,荧光则显示待检测物质的存在。
通过三种光信号,流式细胞仪将细胞分为不同群,进一步区分具有特定标记的细胞,实现细胞分选。
流式细胞图的表示方法包括单参数图(直方图)和散点图。
单参数图以荧光信号或散射光信号的相对强度为横坐标,展示细胞数量。直方图直观,但不适用于比较标记表达量或细胞比例低的情况。
散点图通过将两个参数分别置于x轴和y轴,以密度或轮廓图形式显示频率分布,便于观察不同标记的细胞分布。通过象限标记,可以区分标记情况,如右上象限表示双阳性细胞。
“门(gate)”概念指的是框定特定区域的细胞进行分析。通过选择性显示某个细胞群,简化数据解读。
等高线图与散点图类似,但更直观地展现细胞密度变化,通过密集的等高线表示快速变化的细胞数目密度。
深入理解流式细胞术,推荐观看相关视频,以获得更直观的介绍与指导。