如何选择合适的PCR耗材
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发布时间:2024-10-24 12:55
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时间:2024-11-02 23:36
PCR耗材一般选择聚丙烯(PP)材质,因其生物惰性,表面不易粘附生物分子,具有良好的化学耐性和温度耐受性,适合与试剂或样品直接接触。PP材质在121℃高压灭菌下仍保持稳定,能适应PCR热循环过程中的温度变化。选择高质量、无污染物和抑制剂的PCR耗材至关重要,生产过程必须在限制颗粒数量的洁净环境中进行,确保产品质量。
聚丙烯材质的PCR耗材具备高热传递性,极薄的壁厚可以优化热传递,减少循环时间。管壁厚度并非稳定性决定因素,而是极薄壁设计能够提高热传导效率,确保反应稳定高效进行。选择均一、超薄壁的PCR耗材是提高PCR反应效率的关键。
对于荧光定量PCR(qPCR)实验,推荐使用优质的白色PCR耗材。白色耗材能够最大程度反射荧光信号,减少孔间信号交叉污染,优化实时荧光定量PCR的结果。透明或彩色的PCR管适用于普通PCR反应,彩色透明的管还有助于样品分类管理。管盖应具备高透光性,确保荧光信号的准确采集。
选择PCR耗材时应考虑高防污染性,盖子应紧密且与管子适配性好,以减少交叉污染。PCR板的升孔缘设计便于封膜,降低样品间的交叉污染风险。一端的手持条设计有助于开盖时减少污染。盖子的紧密程度直接影响PCR反应的准确性。
PCR板的孔型设计应根据实验需求选择。平孔缘的反应板适用于大多数PCR仪器,升孔缘的反应板则便于封膜,降低样品间的交叉污染风险。切角位置应符合仪器定位要求,标识则有助于识别单个孔及样品位置。凸出的颜色数字标识或印刻标识适用于自动化应用实验。
PCR管的体积选择应考虑密封性、热传导率和蒸发率。低容反应管或板具有较小的上方空间,可提高热传导率并降低蒸发。在加样时需避免过量或过少,以避免热传导率下降、溢出及交叉污染。常见反应管的规格及体积包括0.5mL、0.2mL、0.15mL、0.1mL等。
PCR耗材应与PCR仪器适配性好,操作简单易行。裙边设计有助于适应自动化应用,提高移液过程中的稳定性。PCR板的裙边分为无裙边、半裙边和全裙边,适应不同实验需求。PCR封板膜应选择高质量产品,提供温度耐受性、密封性、高透明度和操作简便性,确保实验结果的可靠性和准确性。
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